恒溫熒光PCR檢測儀在肉制品摻假與微生物污染檢測方面應(yīng)用廣泛,以下是具體介紹:
一、檢測肉制品摻假
原理:基于DNA的特異性,通過設(shè)計針對不同動物源DNA的特異性引物和探針,利用恒溫擴增技術(shù),在恒定溫度下對肉制品中的DNA進行擴增。如果樣本中存在相應(yīng)的動物源DNA,就會在引物的引導(dǎo)下進行擴增,同時熒光染料或探針會與擴增產(chǎn)物結(jié)合,產(chǎn)生熒光信號,通過檢測熒光信號的有無和強弱來判斷肉制品中是否存在摻假以及摻假的成分和比例。
檢測流程:先將肉制品樣本進行處理,提取其中的DNA。然后將提取的DNA加入到含有特異性引物、探針、酶等試劑的恒溫熒光PCR反應(yīng)體系中,將反應(yīng)體系放入恒溫熒光PCR檢測儀中,設(shè)置合適的溫度和時間進行恒溫擴增。在擴增過程中,檢測儀會實時監(jiān)測熒光信號的變化,當熒光信號達到設(shè)定的閾值時,即可判定樣本中存在相應(yīng)的動物源成分。
優(yōu)勢:檢測速度快,如夏芮智能的FD-PCR0100 PCR恒溫熒光檢測儀可在5-10分鐘內(nèi)快速鑒別動物源制品中豬、牛、羊等8種動物源成分。而且操作簡便,一些儀器將檢測流程簡化為“加樣 — 上機 — 讀結(jié)果”三步,操作人員只需將食品樣品加入到儀器檢測管中即可,其他全部由機器完成。此外,檢測靈敏度高,能夠檢測到極微量的摻假成分。
二、檢測肉制品微生物污染
原理:同樣是利用恒溫擴增技術(shù),針對微生物的特定基因序列設(shè)計引物和探針,對肉制品中可能存在的微生物DNA進行擴增和檢測。當樣本中存在目標微生物時,其特定基因序列會在恒溫條件下被擴增,熒光信號隨之增強,從而實現(xiàn)對微生物的檢測。
檢測流程:先從肉制品樣本中提取微生物的DNA,可以采用物理、化學或酶解等方法。接著將提取的DNA加入到適合的恒溫熒光PCR反應(yīng)體系中,該體系包含針對不同微生物的特異性引物、探針、緩沖液、酶等成分。之后將反應(yīng)體系置于恒溫熒光PCR檢測儀中,根據(jù)不同微生物的特性設(shè)置相應(yīng)的恒溫溫度和反應(yīng)時間進行擴增,最后,通過檢測儀對熒光信號進行實時監(jiān)測和分析,判斷樣本中是否存在目標微生物以及微生物的含量。
優(yōu)勢:與傳統(tǒng)的微生物檢測方法相比,恒溫熒光PCR檢測儀檢測速度快,能夠在幾個小時內(nèi)完成檢測,而傳統(tǒng)方法通常需要較長的時間來培養(yǎng)和鑒定。并且該方法特異性強,能夠準確地檢測出目標微生物,避免了其他微生物的干擾。同時,其靈敏度也很高,能夠檢測到極低濃度的微生物污染。
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